日韩美女在线观看一区_国产98在线 | 欧美_97色碰碰公开视频_天天躁夜夜躁AV天天爽_天天摸夜夜添夜夜添无码_久久国产亚洲高清观看

上海喆圖科學儀器

Zhetu Scientific Instrument

服務熱線:400-001-0304

技術(shù)文章

ARTICLE

當前位置:首頁技術(shù)文章靶細胞殺傷實驗:LDH法

靶細胞殺傷實驗:LDH法

更新時間:2021-07-13點擊次數(shù):1529

一、效應細胞的制備

 

激惹5天后,于無菌條件下取出受鼠引流的腹股溝淋巴結(jié),100目鋼網(wǎng)研磨,調(diào)整細胞濃度為2×107.ml-1。臺盼藍色要求存活率>95%。

 

二、靶細胞的制備

 

P815細胞株系DBA/2小鼠的肥大細胞瘤細胞株。連續(xù)傳代培養(yǎng),調(diào)整細胞濃度為2×105/ml或3.33×105/ml(加入α-Lyt2 mAb時的靶細胞濃度),臺盼藍染色成活率>95%。

 

三、LDH釋放法測定CTL的功能

 

按表1加樣于96孔培養(yǎng)板中,設3個復孔?;靹蛑?a >二氧化碳培養(yǎng)箱中孵育4h。室溫離心,用微量加樣器每孔取上清液100μl,送全自動生化分析儀測定每孔的LDH含量。

 

表1 LDH釋放法測定CTL活性的加樣情況(μl)

分組效應細胞靶細胞α-Lyt2 mAb1% Triton X-100*培養(yǎng)基
自然釋放孔 100  100
最大釋放孔 100 100 
實驗孔1100100   
實驗孔2100 60①40  

 

 

注:靶細胞濃度為3.33×105/ml

四、計算CTL活性

特異殺傷率(%)=(實驗孔LDH值-自然釋放孔LDH值)/(最大釋放孔LDH值-自然釋放LDH值)

 

五、統(tǒng)計學處理

DTH的測定,4組間比較采用方差分析,兩組比較采用q檢驗。對于CTL的特異殺傷率,先進行百分數(shù)的平方根反正弦轉(zhuǎn)換后采用方差分析進行4組間比較,兩兩比較采用q檢驗。

返回列表
  • 服務熱線 400-001-0304
  • 電子郵箱

    zhushumin@zhetu.com

掃碼加微信

Copyright © 2025 上海喆圖科學儀器有限公司版權(quán)所有    備案號:滬ICP備14016230號-3

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    sitemap.xml